冻干siRNA脂质体在胃肠道环境中的命运

由于siRNA本身不能进入细胞,因此必须将siRNA结合到纳米载体中以促进其在细胞内的传递。然而,这些纳米载体与口服、固体剂型的结合以及它们在胃肠道环境中的命运还有待探索。在目前的工作中,研究了(i)裸siRNA、(ii)新鲜制备的siRNA脂质体和(iii)片剂siRNA脂质体在模拟胃液和肠液中的命运。

通过凝胶电泳对脂质体中释放或保护的siRNA进行定量,并在细胞转染中评估siRNA的有效性。新制备的脂质体在37℃模拟胃液中孵育1小时后,siRNA载量和转染效率完全保持不变。然而,在模拟肠液中,尽管6小时后脂质体中没有释放siRNA,但即使在1小时后,基因沉默效果也显著降低。

从片剂中获得的脂质体有效地保护了模拟胃液中的siRNA,从而保持了基因沉默的效果,而在模拟肠液中孵育则导致了显著的siRNA释放,降低了基因沉默的效果。这些结果为理解siRNA在胃肠道条件下的命运提供了详细的解释,当简单地装入脂质体或以片剂的形式。

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材料:特异性于荧光素酶的siRNA(未修饰)(感觉链,5 ' CUU ACG CUG AGU ACU UCG AdTdT 3 ')和作为阴性对照的非沉默siRNA(感觉链,5 ' UUC UCC GAA CGU GUC ACG UdTdT 3 ')来自Eurogentec (Seraing,比利时)。海藻酸钠(文献180947)、干甲醇(99.9%甲醇,额外干,AcroSeal)、葡萄糖、蔗糖、胃蛋白酶(文献P7000)和胰酶(文献P7545)均购自Sigma-Aldrich (St. Quentin Fallavier, France)。在实验室中合成了2-{3-[双-(3-氨基-丙基)氨基]-丙基氨基}- n -二十六烷基氨甲酰基甲基乙酰胺(DMAPAP)。两性离子脂类(1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺)(DOPE)购自法国Avanti极性脂类公司(Coger SAS, Paris, France),海藻糖(Treha®16400)购自嘉吉公司(Paris La Défense, France),甘露醇(Pearlitol®400直流)飞速上升(法国)Lestrem办一座硬脂酸镁来自Cooper (Melun,法国),乳糖(Flowlac®90)Meggle(Wasserburg,德国)和聚丙烯酰胺凝胶(Novex®tbe -尿素凝胶6%)和tbe -尿素样品缓冲液2x均来自Invitrogen公司(巴黎,法国)。

文章信息:Rehman, A.U.;Busignies诉;科埃略·席尔瓦·里贝罗,M.;阿尔梅达拉赫:;Tchoreloff p;Escriou诉;冻干siRNA脂质体在胃肠道环境中的命运。制药学202113, 1807年。https://doi.org/10.3390/pharmaceutics13111807

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